EL PROBLEMA – Falsos negativos en las pruebas de alergia 

Tradicionalmente, las pruebas de alergia en veterinaria giran en torno al ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Consiste en incubar el suero y, a continuación, administrar un reactivo que reconoce la inmunoglobulina E (IgE). La reacción de color resultante muestra la cantidad de IgE presente. Los veterinarios llevan décadas utilizando esta técnica en todo el mundo, y el método no ha cambiado

Sin embargo, los resultados pueden diferir drásticamente entre sí, dependiendo del extracto utilizado. Por ello, los falsos negativos son relativamente frecuentes cuando las concentraciones clínicamente relevantes de alérgenos proteicos son inadecuadas.  

Uno de los alérgenos más comunes son las proteínas de los ácaros del polvo doméstico. El extracto de alérgenos de ácaros del polvo doméstico se obtiene triturando finamente el ácaro y añadiendo disolventes. A continuación, se purifican las proteínas. Hay que tener en cuenta que el ácaro del polvo doméstico contiene más de 10.000 proteínas, de las cuales sólo 40 se reconocen como alérgenos mediante el método anterior.  

Por tanto, cuando se estudia el extracto, solo se observa un pequeño porcentaje de alérgenos, sobre todo cuando una mascota tiene un nivel bajo de IgE para un alérgeno concreto. Además, los extractos pueden mostrar resultados diferentes entre laboratorios y entre extractos, lo que dificulta su reproducción. 

LA SOLUCIÓN -Alérgenos proteicos individuales 

Para obtener una información mejor y más precisa se requiere una investigación que identifique cada alérgeno proteico individual, no el ácaro del polvo doméstico en su conjunto. La alergología molecular contribuye a mejorar la asistencia.  

Macro Array Diagnostics lanzó el Allergy Explorer (ALEX), un perfil de sensibilización alérgica en humanos. Este perfil se elabora a partir de un panel de pruebas basado en extractos de alérgenos y alérgenos moleculares. La organización ha lanzado dos versiones de ALEX desde su creación en 2016, basadas en un panel que cubre casi el 100% de los alérgenos relevantes existentes. También ha lanzado el Food Xplorer (FOX), que detecta intolerancias alimentarias IgG. 

LA INNOVACIÓN -Alergología molecular 

Después de que me diagnosticaran alergia y me hicieran pruebas basadas en alergología molecular, llegué a la conclusión de que la tecnología sería muy aplicable en medicina veterinaria. Con esa idea en mente, Nextmune se asoció con Macro Array Diagnostics para desarrollar el Pet Allergy Xplorer (PAX).  

Se trata de la primera prueba serológica IgE específica para animales de compañía que funciona a partir de extractos de alérgenos y componentes moleculares y está disponible comercialmente.

VENTAJAS 

• Reproducibilidad mejorada: un innovador robot construye cada montaje de prueba ELISA a partir de un método de producción uniforme reproducible. Además, el proceso de fabricación de los extractos de alérgenos está estandarizado, lo que mejora aún más la reproducibilidad. 

• Más datos: las pruebas típicas de alérgenos a través del suero proporcionan alrededor de 90 resultados y las pruebas intercutáneas entre 60 y 80 resultados. El cartucho PAX tiene capacidad para 300 resultados; 100 corresponden a extractos y 200 a componentes moleculares.

• Tecnología automatizada: en todo el proceso se utilizan robots, lo que reduce el riesgo de error humano. Durante la fabricación de las placas, un robot coloca los puntos en la micro matriz. En el proceso, los robots pipetean el suero en la fase de prueba. El cartucho PAX lleva incorporados controles que garantizan que siempre haya suficiente IgE en la muestra para realizar la prueba. También avisan cuando el cartucho no se está utilizando correctamente.

• Manejo mejorado: dado que los datos devueltos por PAX son más sensibles y precisos, se ha mejorado la capacidad de configurar una terapia de sensibilización eficaz para la mascota.

• Identificación mejorada de la reactividad cruzada: dado que tanto los extractos de alérgenos como los componentes moleculares se utilizan en la misma prueba, mejora la identificación de la reactividad cruzada.

• Polisensibilización: si varios alérgenos provocan una reacción, PAX identificará la fuente principal.

• Resultados individualizados: los resultados son específicos para la especie y la región en la que trabajan los veterinarios.

• Mayor precisión: PAX utiliza un único anticuerpo monoclonal anti-IgE bien caracterizado para detectar IgE en animales de compañía, lo que garantiza un nivel de detección. PAX también incluye tecnología para bloquear los determinantes de carbohidratos de reactividad cruzada (CCD). En algunos casos, los CCD se unen a los receptores de IgE, causando falsos positivos. La tecnología PAX bloquea esta unión. Las pruebas de alergia que no usan bloqueadores de CCD identifican numerosos alérgenos, muchos irrelevantes. Esta tecnología garantiza que sólo se identifiquen los alérgenos relevantes para evitar confusiones. 

Desarrollo en curso 

Actualmente, los cartuchos contienen los componentes y extractos de alérgenos que, según las investigaciones, son clínicamente relevantes. Cuantos más datos se recopilen, más componentes se descubrirán. Por ejemplo, si un extracto sigue dando positivo mientras que los componentes moleculares individuales dan negativo, tenemos que ver si está presente un componente no identificado o si hay reactividad cruzada. Estos datos nos ayudarán a caracterizar moléculas para añadirlas a futuras versiones, lo que revolucionará la investigación de las alergias en mascotas". 

Nextmune es el único laboratorio de diagnóstico veterinario que utiliza actualmente la alergología molecular. Este método revolucionario permitirá a los veterinarios diagnosticar con mayor precisión y sensibilidad las alergias de las mascotas y facilitará las estrategias de tratamiento. El primer lanzamiento para perros está previsto para el primer trimestre de 2023, seguido de pruebas para gatos y caballos.