Dopo alcuni mesi di preparazione, la prima e unica piattaforma di allergologia molecolare per animali è pronta per analizzare le sensibilizzazioni mediate da IgE nei cavalli allergici. 

Il PAX per i cavalli è molto simile al PAX per i cani. Come il suo omologo canino, il test equino utilizza cartucce macroarray e attrezzature simili a quelle del test umano ALEX2 dell'azienda Macroarray Diagnostics (MADx) di Vienna, Austria. Tuttavia, ci sono alcune differenze rispetto al test canino:

Ampliamento della lista di allergeni

Ampliamento della lista di allergeni. Il nostro Responsabile di Ricerca e Sviluppo, il Prof. Thierry Olivry, ha esaminato la letteratura esistente alla ricerca di allergeni molecolari già descritti, sensibilizzanti cavalli con dermatite allergica, ipersensibilità alle punture di insetti e asma/malattie reattive delle vie respiratorie. Gli allergeni rilevanti sono stati quindi aggiunti alle cartucce esistenti utilizzate per i cani. Gli allergeni aggiunti rientrano in tre categorie principali: 1) estratti e componenti di insetti pungitori, 2) estratti di semi e 3) lattice (sì, lattice!). Ecco alcune aggiunte significative:

• Insetti pungitori. PAX ora include estratti dell’intero corpo di insetti pungitori come le zanzare Aedes, i moscerini Culicoides, le mosche Stomoxys e le mosche cavalline Tabanus. Un'importante aggiunta sono gli allergeni salivari da Culicoides obsoletus che, come è stato dimostrato, rappresentano un supporto utile nella diagnosi di sensibilità alle punture di insetti nei cavalli.
• Estratti di semi. È stato dimostrato che i cavalli sviluppano una sensibilizzazione mediata da IgE ad alcuni semi ingeriti e, per questa ragione, sono stati aggiunti i relativi estratti (ad esempio, semi di cotone, semi di girasole, semi di lino, semi di lupino, sorgo). È stato anche aggiunto un componente segnalato come importante per i cavalli: Fag e 2 del grano saraceno.
• Componenti del lattice. Potreste chiedervi perché sono stati aggiunti cinque componenti molecolari del lattice. Esistono diversi studi in letteratura sull'asma equina che segnalano una possibile sensibilizzazione al lattice mediata da IgE, che potrebbe essere avvenuta dopo l'addestramento/camminata su tappeti in gomma e la nebulizzazione delle particelle di lattice. Dopotutto, l'asma indotto dal lattice rappresenta anche un'allergia professionale negli addestratori di cavalli!

Un anticorpo monoclonale anti-IgE ben caratterizzato

Dopo aver testato alcuni anticorpi candidati, il nostro team di Ricerca e Sviluppo ha selezionato l'anticorpo monoclonale 3H10, sviluppato per la prima volta nel laboratorio del Dr. Douglas Wilson a Bristol. Questo anticorpo monoclonale riconosce solo le IgE dei cavalli e non reagisce con altri tipi di immunoglobuline equine. Inoltre, questo mAb era già stato utilizzato in diversi importanti studi sull'allergia equina.

PAX per i cavalli è stato poi convalidato utilizzando gli stessi criteri del test umano. L’anticorpo monoclonale selezionato ha superato i test con brillanti risultati, ad eccezione di un piccolo punto: l'emolisi nel siero potrebbe ridurre la positività delle sensibilizzazioni lievi; di conseguenza il livello qualitativo del siero prelevato rappresenta un criterio importante.

A luglio, una volta che il test ha superato la fase di convalida, i nostri laboratori hanno testato 1.150 sieri equini. Questo test ha permesso di selezionare la stessa soglia di positività dei cani: 28 ng/ml.
Volete un’anteprima delle principali sensibilizzazioni nei cavalli? Ecco le prime cinque sensibilizzazioni nelle principali categorie di allergeni, che confermano le scoperte già riportate:

Allergeni ambientali

• Estratto di acaro delle derrate alimentari Tyrophagus
• Estratto di acaro della polvere domestica Dermatophagoides farinae
• Tropomiosina della blatta americana Per a 7
• Componente del lattice: Hev b 11
• Componente salivare di Culicoides obsoletus Cul o 8

Allergeni alimentari

• Componente della mela Mal d 1
• Estratto di semi di cotone
• Componente della mela Mal d 3
• Componente della lenticchia Len c 2
• Estratto di pisello

Allergeni del veleno

Sì, i cavalli vengono punti (e quindi sensibilizzati) da api (componenti Api m 1 e 3) e vespe (estratto Ves v e componente Ves v 5).