Die Zytologie ist das gebräuchlichste und unmittelbar aussagekräftige Diagnoseinstrument in der dermatologischen Praxis, mit dem sich schnell, bequem und kostengünstig feststellen lässt, ob ein Patient eine Hautinfektion hat, welche Art von Infektion (Hefe oder Bakterien) und welche Art von Entzündungszellen vorhanden sind. Für die Durchführung der Ohrenzytologie ist außer Wattestäbchen, Objektträgern, Färbemitteln und einem guten Mikroskop keine spezielle Ausrüstung erforderlich.
Dieser kurze Artikel konzentriert sich auf die Technik der Probenentnahme und die Identifizierung von infektiösen Organismen, Entzündungszellen, morphologischen Veränderungen der Keratinozyten und Artefakten, die auftreten können. Nicht behandelt wird die Technik der Probenentnahme aus Knötchen oder kutanen Neoplasmen, da deren Interpretation zusätzliches Fachwissen und eine spezielle Ausbildung erfordert und den Rahmen dieses Artikels sprengen würde. Rahmen dieses Artikels. Für die zytologische Untersuchung der Haut ist außer Klebeband, Objektträgern, Färbeflüssigkeit und einem guten Mikroskop keine spezielle Ausrüstung erforderlich.
Sie kann dazu beitragen, das Vorhandensein einer Infektion/Entzündungsreaktion und Akantholyse zu bestätigen und deren Art zu beurteilen. Schließlich hilft es bei der Entscheidung, ob ein Abstrich für Kultur und Empfindlichkeit oder weitere diagnostische Tests erforderlich sind.
Die zytologischen Befunde sind auch von unschätzbarem Wert, wenn es darum geht, die richtige Behandlung zu wählen und das Ansprechen auf die Therapie zu überwachen.
Die Wahl der Technik hängt von der zu beprobenden Stelle ab:
Glasdia-Abdrücke
Abdrücke können von jeder exsudativen Läsion genommen werden. Eine Pustel wird mit einer feinen Nadel oben geöffnet, bevor einige Abdrücke direkt auf einen Objektträger genommen werden. Durch leichtes Verschieben des Objektträgers vor jedem Abdruck wird eine zu dicke Materialansammlung vermieden. Die Beprobung des Randes einer Kollarette kann mehr Mikroorganismen liefern als die Beprobung der Mitte der Läsion.
Wenn Sie Wenn Sie eine Kruste haben, ist es besser, die Hautoberfläche oder den Bereich unter der Kruste zu untersuchen. Abdrücke von der Unterseite einer Kruste können diagnostisch wertvoll sein, insbesondere bei Verdacht auf Pemphigus foliaceus. Das Material, das aus einer Fistel austritt, sollte durch Drücken der Haut um die Fistel oder durch Einführen eines Wattestäbchens in die Fistel gesammelt werden.
Bei der Gewinnung direkter Abdrücke ist darauf zu achten, dass die Zellen nicht beschädigt werden, was die Zytologie uninterpretierbar macht. Wenn ein direkter Abdruck nicht möglich ist, kann mit einem Wattestäbchen Material von einer Läsion auf den Objektträger übertragen werden.
Acetat-Streifen
Transparentes Acetatband wird verwendet, um Proben von trockenen Läsionen zu gewinnen, die nicht ohne weiteres auf einem Objektträger haften bleiben, oder um Proben von Bereichen (Hautfalten und Interdigitalräume, Abb. 3) zu gewinnen, die mit einem Objektträger nur schwer zu erreichen sind.
Ein Klebebandstreifen, der etwa 50 % länger als ein Objektträger ist, wird verwendet. Die Mitte der klebrigen Seite des Klebebands wird mehrmals fest auf die Stelle gedrückt, um Epidermisreste aufzunehmen und Proben zu gewinnen. Jedes Ende des Klebebands wird dann an einem Ende eines Objektträgers befestigt, so dass eine Schleife entsteht, und gefärbt. Anschließend wird das Klebeband um beide Enden des Objektträgers gewickelt, wodurch dieser fest in Position gehalten wird und die mikroskopische Untersuchung unter Ölimmersion erleichtert wird.
Bei Proben wie Eiter wird der Objektträger zunächst an der Luft getrocknet und dann gefärbt. Die einfachste Färbung, die Sie selbst verwenden können, ist eine kommerzielle modifizierte Wright-Färbung wie Diff-Quik. Beachten Sie, dass Bakterien und Hefen bei Verwendung der Diff-Quik-Färbung immer blau gefärbt werden. Ähnlich werden Acetatstreifenproben mit Diff Quik gefärbt, allerdings nur mit den roten und blauen Farbstoffen. Die Verwendung des alkoholischen Fixiermittels würde den Kleber des Bandes auflösen.
Bei der mikroskopischen Untersuchung ist es wichtig, den Lichtkondensator bei der Untersuchung einer zytologischen Probe hochzuhalten. Zytologische Präparate sollten zunächst bei geringer Leistung auf einen Bereich mit gleichmäßig verteilten Zellen in einer Schichtdicke untersucht werden.
Für die detaillierte Untersuchung der Zellmorphologie empfiehlt sich dann die Verwendung eines x100-Ölimmersionsobjektivs.
Die häufigsten Arten von Organismen, die in der kutanen Zytologie angetroffen werden, sind Hefen und Bakterien. Der häufigste Hefeorganismus, der in Proben von Hunden und Katzen gefunden wird, ist Malassezia pachydermatis, obwohl auch Candida spp. auf der Haut gefunden werden kann. Die Vielfalt der Bakterien, die in der kutanen Zytologie gefunden werden können, ist groß. Staphylococcus spp. ist jedoch das häufigste Bakterium, das aus Hautinfektionen bei Hunden und Katzen isoliert wird. Ein weiteres, gelegentlich anzutreffendes Bakterium ist Simonsiella spp. (Abb. 4).
Es handelt sich um harmlose, sehr große, fadenförmige, gramnegative Saprophyten, die in der Mundhöhle verschiedener warmblütiger Wirbeltiere leben. Sie kommen in der Regel in geringer Zahl vor und sind nicht intrazellulär (obwohl sie an Keratinozyten haften können). Es ist nicht bekannt, dass diese Organismen pathogen sind; wenn sie jedoch an Stellen gefunden werden, die nicht mit der Mundhöhle in Verbindung stehen, wie z. B. die Interdigitalräume, ist ihr Vorhandensein wahrscheinlich mit Juckreiz verbunden.
Dermatophyten und andere Pilzorganismen können auch in der Zytologie gefunden werden. Dermatophytensporen erscheinen oft als runde Kugeln, die etwa doppelt so groß sind wie kokkoide Bakterien. Der Nachweis von Entzündungszellen in der Zytologie kann einen Hinweis auf die Pathogenese der Läsion geben. Das Vorhandensein von degenerierten neutrophilen Granulozyten mit intrazellulären Bakterien ist in den meisten Fällen ein Hinweis auf eine Pyodermie. Wenn gut erhaltene Neutrophile zu sehen sind, können Erkrankungen wie Pemphigus foliaceus in Betracht gezogen werden.
Gelegentlich kann die Kraft, die zur Gewinnung einer Exfoliationsprobe erforderlich ist, vorhandene Entzündungszellen, insbesondere Neutrophile, zerreißen. In diesem Fall ist das Kernmaterial dieser Zellen oft auf dem Objektträger verstreut und kann bei geringer Leistung identifiziert werden. Das Vorhandensein von Eosinophilen weist auf eine Entzündung hin, die auf Parasiten, Überempfindlichkeitsreaktionen oder eosinophile Granulome bei Katzen zurückzuführen ist.
Andere häufig erkannte Entzündungszellen sind Makrophagen und Lymphozyten. Diese sind in der Regel bei chronischen oder tieferen Läsionen zu finden. Makrophagen sind effiziente phagozytische Zellen und enthalten oft effete Neutrophile, rote Blutkörperchen, Bakterien, Pilzelemente und sogar intrazelluläre Parasiten wie Leishmania spp. und andere.
Epithelzellen, die normalerweise in der Exfoliativzytologie gefunden werden, sind Korneozyten (kernlose Keratinozyten). Keratinozyten sind ein normaler Befund; bei kranker Haut hat die Morphologie der Keratinozyten jedoch oft diagnostischen Wert. Kernhaltige Keratinozyten finden sich normalerweise in Proben von Schleimhäuten oder wenn die Hautoberfläche vor der Zytologie abgeschabt wurde. Werden sie in oberflächlichen Hautproben gefunden, deutet dies auf einen abnormen Umsatz der Epithelschichten oder eine Erosion der Verhornungsschichten hin.
Diese Keratinozyten enthalten oft keratohyaline Granula und sollten nicht mit Bakterien verwechselt werden. Anstatt als flache, scharf gewinkelte große Zellen zu erscheinen, können einige Keratinozyten oder Korneozyten in der Routinezytologie gerollt oder eher spindelförmig erscheinen, da sie bei der Probenahme und Fixierung gefaltet und gerollt wurden. Akantholytische Zellen sind Keratinozyten der unteren Schicht, die ihre Adhäsion zu benachbarten Keratinozyten verloren haben. Sie treten am häufigsten bei Pemphigus-foliaceus-Läsionen auf, können aber auch bei tiefer Furunkulose als Folge von Krankheiten wie Demodikose und Dermatophytose beobachtet werden. Akantholytische Zellen sind große, runde Zellen mit einem zentralen Zellkern. Sie weisen häufig eine dunkelblaue Peripherie auf, die auf eine Antikörperbeschichtung hinweisen kann.
Bei Pemphigus sind sie häufig in Rafts und zwischen gut erhaltenen Neutrophilen und/oder Eosinophilen zu finden. Bei Demodikose oder Dermatophytose sind akantholytische Zellen in der Regel spärlich vorhanden und befinden sich zwischen degenerierten Entzündungszellen. Artefakte sind auf zytologischen Objektträgern häufig anzutreffen.
Sie können oft mit signifikanten Befunden verwechselt werden. Viele exsudative Proben haben einen stark eiweißhaltigen Hintergrund, der oft hellviolett oder rosa aussieht und feine, dunkler gefärbte Körnchen aufweist, die mit kleinen Bakterien verwechselt werden können. Melaningranula können auch mit stäbchenförmigen Bakterien wie Pseudomonas spp. verwechselt werden. Melaninkörnchen sind jedoch meist in und um Keratinozyten zu finden, färben sich refraktär braun bis schwarz und sind sehr gleichmäßig in ihrer Größe.
In den Frühlings-/Sommermonaten ist es nicht ungewöhnlich, dass man insbesondere bei Proben aus den Zahnzwischenräumen pflanzliche Pollen findet. Sie kommen in verschiedenen Formen und Größen vor und werden oft mit Pilzelementen verwechselt.
Schlussfolgerungen
In einem bestimmten Monat werden in einer dermatologischen Überweisungspraxis zytologische Proben von etwa 80 % der vorgestellten Patienten entnommen, was etwa 10 bis 20 % der Gesamteinnahmen der Klinik ausmacht!
Die kutane Zytologie ist kostengünstig, höchst informativ und leicht selbst zu erlernen. Wenn die Zytologie Teil der täglichen Praxis wird, werden Diagnostik und Behandlung kompetenter und das Fallmanagement wird sofort lohnender. Das Endergebnis sind deutlich zufriedenere Patienten und Kunden.